植物组织培养方面的实验操作经验总结
刚开始接触植物组织培养这方面的实验，实验操作中许多需要注意的事项还不是很清楚，希望能够得到大家的帮助，减少实验污染。
培养基，器皿灭菌，超净台使用前Zui好紫外照至少半个小时，操作前把手洗净并用70%乙醇涂抹杀菌，操作时在酒精灯灯焰附近，但要注意不要烫伤植物材料。刚开始做染菌总是不可避免的，操作几次熟练了就没问题了
初代培养：
1、外植体的选择及消毒：
幼年组织比老年组织具有较高的行态发生能力。外植体的大小茎段长0.5cm，叶片面积5mm2。 把材料切割成适当大小，即灭菌容器能放入为宜。在超净台用70％酒精消毒10-30s；用杀菌剂0.1%升汞处理5-20 min；
用无菌水涮洗几次，每次不少于3min，以尽量去除残毒。
2、无菌操作
⑴ 超净工作台灭菌 开始无菌操作前半小时，打开超净工作台上的紫外灯，照射20分钟后，关闭紫外灯，使超净工作台正常送风，10分钟左右后，即可开始无菌操作。
⑵ 双手及接种器械灭菌 进行无菌操作前，先用肥皂洗涤双手，穿好工作服。用70％～75％的酒精擦拭台面并消毒双手。所有接种器械用75％酒精浸泡，在酒精灯上灼烧灭菌。
⑶ 接种 切去材料两端各0.5cm左右长度茎段，将茎段接种到初代培养基上。在培养容器上标明培养基代号和接种日期。
3、污染的原因及对策
污染：组培过程中培养基和培养材料滋生杂菌导致培养失败现象。
（1）污染的原因
外植体带菌，培养基灭菌不彻底，操作员不遵守操作规程等。细菌污染 在接种后1-2天可发现，菌斑呈粘液状。
真菌污染在接种3天后可发现，污染部分长有不同颜色的霉菌。
（2）污染的预防措施
将取的枝条用水冲干净后插入自来水中使其抽枝，用新抽的枝作外植体。
晴天中午到下午采样；
操作人员严格遵守操作规程接种；
培养基及其用具灭菌要彻底。